菲律宾马尼拉彩票盘

FUWUREXIAN:0510-85514690 SHOUJI:189 6179 4690

欢迎光临江苏省苏微微生物研究有限公司官网

始于1978,真菌毒素检测专家参与起草中华人民共和国国家标准GB13078-2017《饲料卫生标准》GB/T17480-2008《饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法》GB/T19539-2004《饲料中赭曲霉毒素A的测定》GB/T19540-2004《饲料中玉米赤霉烯酮的测定》

全国服务热线:189 6179 46900510-85514690

当前位置: 菲律宾马尼拉彩票盘 > 苏微技术 > 苏微免疫亲和柱测定液相色谱条件--黄曲霉毒素总量免疫亲和柱

苏微免疫亲和柱测定液相色谱条件--黄曲霉毒素总量免疫亲和柱

文章出处:admin责任编辑:苏微人气: 发表时间2020/9/1 10:04:04【
 

黄曲霉毒素总量免疫亲和柱净化--高效液相测定方法

1.配制标准品:

1.1 标准品

黄曲霉毒素总量(AFT,纯度≥98.0%),其中AFB1、AFG1、AFB2、AFG2浓度分别为1.06μg/mL、0.95μg/mL、0.33μg/mL、0.29μg/mL,购于Sigma试剂公司。

1.2 标准溶液配制:

1.2.1 标准储备液:用移液管准确移取0.5mL原浓度标准品至5mL容量瓶中,用流动相定容至刻度,配制成AFB1、AFG1、AFB2、AFG2浓度分别为106ng/mL、95ng/mL、33ng/mL、29ng/mL的标准储备液,-20℃避光保存。

1.2.2系列标准工作液:根据需要用移液管准确移取适量标准储备液,用流动相定容至刻度,配制成AFB1浓度为2.12ng/mL、4.24ng/mL、8.48ng/mL、10.6ng/mL、21.2ng/mL,AFG1浓度为1.9ng/mL、3.8ng/mL、7.6ng/mL、9.5ng/mL、19ng/mL,AFB2浓度为0.66ng/mL、1.32ng/mL、2.64ng/mL、3.3ng/mL、6.6ng/mL,AFG2浓度为0.58ng/mL、1.16ng/mL、2.32ng/mL、2.9ng/mL、5.8ng/mL的系列标准工作液,-20℃避光保存。三个月内有效。

 

2.测定

2.1 黄曲霉毒素总量免疫亲和柱净化--高效液相色谱参考条件:

a) 色谱柱:Hexi C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒度4μm;

b) 流动相:甲醇-水(45:55,体积比);

c) 流速:0.8mL/min;

d) 检测波长:激发波长365nm,发射波长440nm;

e) 进样量:20μL;

f) 柱后光化学衍生器;

g) 柱温:40℃。

2.2 标准曲线的制作

将系列AFT标准工作液按浓度从低到高依次注入高效液相色谱仪,得到相应的峰面积。以目标物质的浓度为横坐标,目标物质的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

2.3 试样溶液的测定

黄曲霉毒素总量免疫亲和柱净化后待测试样溶液注入高效液相色谱仪,得到AFT的峰面积。由标准曲线计算得到试样溶液中AFT的浓度。

2.4 AFT参考谱图:

注:目标物质AFB1、AFG1、AFB2、AFG2出峰时间依次为8.752min、10.225min、12.284min、14.737min。

 

联系苏微

全国服务热线:189 6179 46900510-85514690

DIANHUA:0510-85514690

CHUANZHEN:0510-85500928

YOUXIANG:75500519@qq.com

DIZHI:JIANGSUSHENGWUXISHIQIANRONGLU7HAO(WUXIMEIYUANPANG)